Spiegazione dettagliata della volatilizzazione del reagente negli esperimenti di PCR

Spiegazione dettagliata della volatilizzazione del reagente negli esperimenti di PCR.

Nell'esperimento PCR, dopo aver aggiunto il sistema di reazione, copriamo attentamente il coperchio e confermiamo ripetutamente che il coperchio è chiuso per evitare la volatilizzazione del reagente. Ma a volte abbiamo anche dubbi: abbiamo confermato che il coperchio è strettamente chiuso, ma dopo che l'esperimento è stato completato, il reagente evapora ancora. qual è la ragione?

In effetti, la volatilizzazione del reagente è uno dei problemi più comuni negli esperimenti di PCR e ci sono molti fattori che influenzano la volatilizzazione del reagente.

L'evaporazione si riferisce a quella durante l'esperimento della PCR, la soluzione di reazione evapora ad alta temperatura, quindi si condensa sulla parete della bottiglia o sulla copertura superiore per formare gocce di nebbia d'acqua o acqua, oppure trabocca direttamente dallo gap d'aria del tappo della bottiglia, risultante in un cambiamento nella concentrazione della soluzione di reazione. Le variazioni, la quantità di soluzione di reazione sono diminuite e alcuni addirittura sono evaporati alla secchezza, con conseguenti esperimenti non validi.

1. Pressione del coperchio caldo, temperatura

Negli esperimenti di PCR, di solito riscaldiamo il coperchio per prevenire la condensa del vapore di reagente. La temperatura del coperchio riscaldato è generalmente superiore a quella della soluzione di reazione per prevenire la condensazione dei vapori.

I coperchi di riscaldamento del ciclo termico possono essere approssimativamente divisi nei seguenti quattro tipi: coperchi di riscaldamento non regolabili, coperchi di riscaldamento regolabili, coperchi di riscaldamento adattivi e coperchi di riscaldamento automatico. Il coperchio riscaldato regolabile presenta compressione a tenuta delle dita. Se non si sono stretti strettamente, i reagenti evaporanno. L'evaporazione dei bordi può essere ridotta al minimo aumentando la pressione sul coperchio riscaldato. A volte il apertura può pizzicare il tubo e ruotare la manopola. In circostanze normali, la copertura elettrica di riscaldamento intelligente può rilevare automaticamente materiali di consumo di diverse altezze, comprimere automaticamente i materiali di consumo e la pressione è uniforme e costante, riducendo così l'evaporazione del reagente e gli errori manuali e migliorando l'accuratezza e la ripetibilità sperimentali.

2. Deformazione dei materiali di consumo

Per le perdite di vapore, la maggior parte delle persone pensa che la pressione del coperchio caldo non sia sufficiente. La pressione del coperchio caldo è molto importante, ma questo è solo un aspetto. In effetti, anche i materiali di consumo sono molto importanti.

Le piastre di orifizio di PCR sono generalmente realizzate con materiali plastici, che si espandono e si deformano notevolmente dopo essere state riscaldate. La velocità di espansione termica della base metallica PCR utilizzata per posizionare la piastra dell'orifizio PCR è estremamente bassa e la piastra dell'orifizio di PCR non può espandersi normalmente lungo il piano dopo l'espansione termica. Lo stato di rigonfiamento rende la copertura del calore superiore incapace di contattare completamente la superficie della piastra dell'orifizio PCR, con conseguente temperatura e pressione irregolari, causando l'evaporazione del reagente sul bordo della piastra dell'orifizio PCR e influenzando l'effetto di rilevamento della PCR.

3. I materiali di consumo non sono strettamente sigillati

La tenuta del coperchio termico e i materiali di consumo non significa che il tappo del tubo PCR sia strettamente chiuso e la qualità della piastra di pozzetto PCR è irregolare. I materiali di consumo di alta qualità, la superficie dell'ugello e il coperchio sono lisci e il sigillo dietro il coperchio della scatola è buono e non è facile da perdere. I consumamenti inferiori hanno beccuccio irregolari e linee radiali, che possono facilmente causare perdite o addirittura asciugare.

Pertanto, negli esperimenti di PCR, prova a scegliere materiali di alta qualità e adatti. Allo stesso tempo, il sistema di reazione può essere ampliato per ridurre al minimo l'influenza dell'evaporazione del sistema sulla reazione.